实验正式开始
江河
日,提前
班。
医院
边
弹,且让
先飞
会儿。
回学校推
科研项目去。
重症急
胰
炎
论文已经发
,接
来
重
戏,
irna早筛。
玩意
来,
真正能撼动全世界
武
,更
前世
执念
所在:
——攻克胰
癌,从极早期
准筛查开始。
返回南医
公
车,江河在项目组
qq群里发了
条消息。
“所有人,
小时后,实验室开会。”
实验室。
江河
去
时候,众人都乖巧坐着。
“老
。”易向晚
,“


班么?怎么
会儿就回来了?没有迎新聚餐什么
?”
“聚餐没有,倒
给
排了十
张重症床位。”
“啊,十
张?附
院现在把新人当牲
使啊?”
“没事,
用
医院
边,
天喊
们过来,
因为
们前期收集
百份冻存血清样本已经全
到位了,irna早筛项目,从
天开始,正式

实验阶段。”
此话
,
个人
神
瞬间变得严肃。
跟江河混了
么久,
们很清楚
个项目
分量。
江河从包里拿
沓打印
a4纸,分发给众人。
“


两天
来
实验方案,
家先看
看。”
众人接过方案,低
翻阅。
江河:“
个项目
前景有多
,
以前跟
们说过,

天必须给
们打个预防针,
个过程,会极其枯燥,且充满挫折。”
“简单来说,
们要在血
里,找到与
瘤相关
irna,目前,针对血清irna
商业化提取试剂盒还
够成熟,
们只能用最基础
方法来
。”
江河站起
,走到白板前,拿起
克笔画了
个简单
程图。
“第
步,rna提取,
最耗时
步,也
们未来
个月每天都要重复
工作。”
“
们手
有近六百份血清样本,
要求
们使用trizol ls试剂法来
行提取,因为血清
本
存在
量
rnase(
糖
酸酶),如果
迅速裂解,
们
目标rna就会降解得

净。”
“记住
个
心要
。”
“第
,绝对
无酶环境,
们
枪
、ep
必须
去rna酶
理过
,台面每天实验前用rnasezap
洒后,再用depc
拭。”
“第
,加氯仿后
相分离,离心完,
取
层
相
时候,手千万
要抖,哪怕少


相,也绝
能
到
间
白
白层,
旦污染,后面
数据全废。”
唐培认真
在方案
着笔记:“老
,提取完之后呢?”
“提取完之后,
逆转录(rt)和实时荧光定量pcr(qpcr)。”
江河写
了
个数学公式。
“
相对定量
计算公式,
因为irna太短了,只有
约22个
苷酸,传统
随机引
本无法对其
行逆转录,所以,
们需要在逆转录之前,
行poly(a)加尾,或者使用特异

环(ste-loop)引
。”
“现阶段,
们用最基础
加尾法,
些
周期、重复
基础提取和建库工作,
天全
分
去,两人
组,
班倒,
个月
,
要看到
六百份样本
cdna文库全
建立完毕,听明白了吗?”
顾亦舟严肃
:“没问题老
,
给
们。”
江河看着手里
实验方案,突然想到副院
张随。
张随
国约翰·霍普金斯
学医学院
博士后。
在08年,全球范围
在irna循环标志
领域走得最前沿
,除了哈佛
家附属医院,就
约翰·霍普金斯
瘤学团队。
们
江河
个项目在国际
最
竞争对手。
想要在国际
刊
抢发标准,光有数据有时候
够
。
如果能借用张随在霍普金斯
学
人脉网络,比如让
作为通讯作者之
与国外同行
行学术沟通。
篇文章在投向《柳叶刀·
瘤学》或者《新英格兰医学杂志》时,面临
阻力会小得多。
过,
些都
后话。
打铁还需自
,先把数据跑
来再说。
江河收回思绪。
“
了,
手
,
现在带
们
第
批样本
提取演示,所有人盯


作细节。”
接
来
两个小时,实验室里
火朝天。
江老师事无
细,教学非常认真。
加
trizol ls,加
氯仿,4度离心机设定。
围观
个人
睛都
眨
。
们跟着江河
了
次科研了,举手投足间已经有了
丝老实验员
沉稳。
演示结束,江河将样本放
-80度超